细胞给药看似简单，实则超多细节！常见问题基本都出在浓度计算、溶剂搭配、操作规范上。海南动物实验科研服务平台为大家整理了一套超精简的标准化实操流程，新手直接套用，轻松避坑、少走弯路。

1．计算方法

药物用量计算

药物质量 = 目标浓度 × 溶液体积 × 药物分子量

浓度单位换算

mM 与 mg/mL 可根据药物分子量进行快速转换

稀释计算原则

C₁ × V₁ = C₂ × V₂（浓度 × 体积保持恒定）

2．溶剂选择

水溶性药物→ 使用无菌纯水配制

难溶性 / 脂溶性药物→ 优先选择 DMSO 溶解

重要提醒：DMSO 母液加入细胞实验前需充分稀释（通常建议 1000 倍以上），避免溶剂造成细胞毒性。

3．浓度设置

优先参考同细胞系相关文献中的推荐浓度范围

无参考数据时：先进行宽范围梯度初筛，再缩小范围进行精细优化

推荐设置：采用等比浓度梯度，每个浓度设置 6–10 个复孔，必须设置空白对照组

4．96 孔板给药流程

贴壁细胞：

弃去旧培养基

→ PBS 轻柔清洗

→ 加入药物处理液继续培养

悬浮细胞：

离心收集细胞

→ 可根据实验需求省略清洗步骤

→ 直接进行药物处理

5．给药操作注意事项

全程保持无菌操作，防止污染

移液、称量保持精准，减少浓度误差

药物完全溶解后，使用 0.22 μm 滤膜进行除菌过滤

提前开展预实验，确定合适浓度，避免药物浓度过高导致细胞损伤或死亡

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